抗菌整理織物的評價AATCC 100
編輯:2022-01-20 10:47:23
美國紡織印染師協(xié)會標準
AATCC 100-2004抗菌整理織物的評價
1. 目的和范圍
1.1 本方法提供了抗菌性能定量評價的操作程序。抗菌整理織物的評價取決于所使用材料抗菌性能。若材料僅有抑菌性能(抑制細菌繁殖),則采用抗菌處理和無抗菌處理的樣品相比較的定性方法AATCC147即可。若材料具有或應(yīng)用殺菌性能,則還須進行定量評價。定量檢測可為抗菌整理織物及材料的應(yīng)用提供更為明確的藍圖。
2. 原則
2.1 首先采用AATCC 147對試驗樣品和對照樣品進行定性的抗菌性能試驗。若呈現(xiàn)抗菌性能則可進行定量試驗。對試驗樣和對照樣接種試驗菌,培養(yǎng)后,加入定量的中和液采用振蕩方式將試片中細菌洗脫出。對洗出液進行活菌計數(shù),計算試驗樣的細菌減少率。
3. 術(shù)語
3.1 (抗菌劑的)活性:抗菌劑抗菌性能的量度。
3.2 抗菌劑:指能殺死細菌或影響細菌繁殖、生長以及活性(抑菌劑)的化學物質(zhì)。
4. 安全措施
注意:本安全措施僅提供相應(yīng)的信息,是試驗輔助環(huán)節(jié),并非必備程序。用本方法試驗時,用戶有責任采用安全、恰當?shù)募夹g(shù)來處理材料。必須向生產(chǎn)商咨詢諸如材料的安全性數(shù)據(jù)和其他推薦之類的特殊細節(jié)。必須咨詢并遵循OSHA(職業(yè)安全和衛(wèi)生管理局)的標準及規(guī)則。
4.1 開展定性試驗和定量試驗均必須是經(jīng)過微生物操作培訓和有技術(shù)經(jīng)驗的人。必須咨詢并遵循美國健康和公益產(chǎn)業(yè)部的《微生物學和生物醫(yī)學實驗室安全規(guī)范》執(zhí)行。
4.2 警告:試驗中的某些微生物能傳染給人類并引發(fā)疾病。因此試驗及相關(guān)人員必須采取合理的保護措施,避免傷害。穿防護服和戴防毒面罩來避免細菌的感染。
4.3 養(yǎng)成良好的試驗習慣,在實驗區(qū)內(nèi)佩戴防護鏡。
4.4 小心取用所有的化學藥品。
4.5 洗眼的藥水和安全性淋浴應(yīng)就近放置以備緊急使用。
4.6 試驗前,對所有有可能受污染的樣品和材料進行滅菌。
4.7 暴露在試驗所用化學試劑的劑量應(yīng)控制在或低于政府機構(gòu)設(shè)立的標準(如OSHA規(guī)定的暴露極限[PEL],參考1989年1月1日的1910.1000CFR的29。)此外,推薦采用下列規(guī)范作為暴露于氣體污染物的一般性指導:美國政府企業(yè)衛(wèi)生專家大會(ACGIH)的閾限值(TLV),包括時間加權(quán)平均閾限值(TLV-TWA)和短時間接觸閾限值(TLV-STEL),上限值(TLC-C)等。
5.限制
5.1 定性試驗是相對快捷、方便測定織物殘余抗菌性能的方法,可參考AATCC 147織物抗菌性能評價:平行劃線法。
6.試驗菌種
6.1 試驗細菌
6.1.1 金黃色葡萄球菌 ATCC 6538 革蘭氏陽性菌
6.1.2 肺炎克雷伯氏菌 ATCC 4352 革蘭氏陰性菌
6.1.3 也可根據(jù)需要或用途選用其他菌種
7.培養(yǎng)基
7.1 適宜的肉湯/瓊脂培養(yǎng)基由營養(yǎng)物質(zhì)、大豆蛋白和腦心浸液(肉湯)組成
營養(yǎng)肉湯:
蛋白胨(細菌蛋白) 5g
牛肉浸膏 3g
蒸餾水 1000ml
7.2 加熱至沸騰以促進溶解分散,用1mol /L NaOH或更低濃度溶液調(diào)節(jié)pH=6.8±0.1(若采用脫水培養(yǎng)基成品直接配制,則不需要此步)。
7.3 量取10ml加入到常規(guī)細菌培養(yǎng)管(125×17mm),具塞后并在121℃、103kPa(15psi)的壓力下滅菌15分鐘。
7.4 營養(yǎng)瓊脂:加1.5%細菌用瓊脂到營養(yǎng)肉湯中,加熱至沸騰。用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH=7.1±0.1。取15±1ml放入常規(guī)細菌培養(yǎng)管,塞上塞子并在103kPa的壓力滅菌15分鐘(也可用1000ml硼硅酸鹽燒瓶裝來滅菌,然后從燒瓶中將其倒入培養(yǎng)皿)。
7.5 漿狀接種物(用于疏水性織物):
氯化鈉 8.5g
瓊脂 3.0g
蒸餾水 1000ml
8. 試驗菌的保藏
8.1 用直徑為4mm接種環(huán)將菌株轉(zhuǎn)接到營養(yǎng)肉湯中,每天連續(xù)轉(zhuǎn)接不超過2周(即14代以內(nèi),用3~14代細菌進行實驗)。2周后,重新從保藏菌株上進行轉(zhuǎn)接,在37±2℃(或其它適宜溫度)下培養(yǎng)。
8.2 在營養(yǎng)瓊脂或適宜的瓊脂斜面上保藏細菌,在5±1℃下保藏,并1個月轉(zhuǎn)接一次。
9.定性試驗(推斷性試驗)
9.1 用AATCC 147和上文的試驗菌株來評價試驗樣和對照樣的抑菌性能。若發(fā)現(xiàn)材料有明顯的抗菌作用,則驗證其殺菌性能,需繼續(xù)進行下文的定量試驗。
10定量試驗(確定性試驗)
10.1 樣片制備 以下描述均指織物樣品。對于無紡布,需對本法進行適當修正,再進行試驗。
10.1.1 樣片的尺寸和形狀:將樣品裁剪成直徑為4.8±0.1cm(1.9±0.03英寸)圓片,將這些樣片置于250ml帶蓋的廣口玻璃錐瓶中。樣片數(shù)量取決于材料種類和織物結(jié)構(gòu),以剛能吸收1.0±0.1ml菌液為標準。如約4片棉布可吸入1ml,每瓶用的樣片數(shù)須在報告中注明。
10.1.2 對照樣 與試驗樣片同材質(zhì)但沒有進行抗菌整理。(陰性控制)
10.1.3 樣片滅菌 本步驟為可選。滅菌方法取決于織物種類和整理方法。棉布、醋酸纖維和很多人造纖維都可用高壓法滅菌,羊毛可用環(huán)氧乙烷滅菌或間歇蒸汽滅菌。間歇蒸汽滅菌也是對某些抗菌處理損害較小的方法。如使用了滅菌方法,則須在報告中注明滅菌方式。
10.1.4 每個樣品平的接種菌液量:取1.0±0.1ml一定濃度的菌液(把24小時肉湯培養(yǎng)物稀釋得到)滴加到每個樣品上,以保證每個對照樣和抗菌試樣0接觸時間的回收活菌數(shù)為1~2×105cfu,稀釋菌液必須采用營養(yǎng)肉湯。
10.2 試驗操作
10.2.1 樣片的接種 若使用金黃色葡萄球菌,在配制接種液前對24小時培養(yǎng)物充分振蕩,靜置15~20分鐘。將樣片分別放于滅菌的培養(yǎng)皿中,然后用微量移液器將稀釋后的菌液均勻接種到樣片上。將這些樣片在無菌狀態(tài)下轉(zhuǎn)移到廣口瓶中,蓋緊瓶蓋以防蒸發(fā)。
10.2.2 接種后(0接觸時間)盡快向?qū)φ諛?、抗菌樣以及未接種的瓶中加入100±1ml中和液。
10.2.3 中和液應(yīng)包括中和特定抗菌整理的組分,注意部分織物的PH值要求。記錄所用中和液。
10.2.4 充分振蕩1分鐘,洗脫液用水進行適當?shù)奶荻认♂專⒚看蜗♂尯蟮娜芤航臃N到2份營養(yǎng)瓊脂上。稀釋倍數(shù)通常為100 、101、102。
10.2.5 一定時間的接觸培養(yǎng)。將其余未稀釋的含有接種對照樣和抗菌樣的小瓶在37±2℃條件下培養(yǎng)18~24小時。類似的,也可進行其他時間(如1小時、6小時)的培養(yǎng),來測定這些時間的殺菌效果。
10.2.6 接種培養(yǎng)后樣片的計數(shù) 培養(yǎng)后,分別在對照樣和抗菌樣的瓶中加入100±1ml中和液,振蕩1分鐘,用水進行適當倍數(shù)的梯度稀釋,并將每次稀釋后的溶液接種到2份營養(yǎng)瓊脂上。稀釋倍數(shù)通常為100 、101、102。對抗菌樣片,可能需要其他的稀釋倍數(shù)。
10.2.7 在37±2℃(或其它適宜溫度下)對各培養(yǎng)皿進行24~48小時培養(yǎng)。
11.評價
11.1 報告每片樣品的細菌數(shù),如經(jīng)100稀釋度培養(yǎng)得到的細菌數(shù)為“0”,則記錄為“<100”。
11.2 根據(jù)下式計算抗菌樣片的細菌減少率。
(1)R(%)=100(B-A)/B
其中:
R--細菌減少率(%)
A--一定時間培養(yǎng)后的抗菌樣的菌落數(shù)
B--0接觸時間抗菌樣的菌落數(shù)
(2)R(%)=100(C-A)/C
其中:
C--0接觸時間對照樣的菌落數(shù)
如B和C相差很大,則取其中大的值。如B,C相差不大,則采用下式進行計算:
(3)R(%)=100(D-A)/D
其中:D=(B+C)/2
11.3 如不能得到未處理樣品,則利用下式計算,該式考慮了對試驗產(chǎn)生干擾作用的各種微生物的作用
Bg(%)=100[]
其中:
E-- 未接種抗菌樣的活菌數(shù)(存在的背景細菌)
F-- 未接種、預(yù)濕處理的抗菌樣在培養(yǎng)一段時間后的活菌數(shù)(培養(yǎng)后的背景活菌數(shù))
Bg-- 背景微生物
11.4 試驗有效的條件:應(yīng)同時滿足(1)和(2)。
(1)未接種試樣上的活菌數(shù)為0;
(2)接種培養(yǎng)后對照樣上的活菌數(shù)明顯高于0時間細菌數(shù)。此點僅適合于用營養(yǎng)肉湯作為稀釋液的情況。
11.5 報告抗菌樣品對各細菌的減少百分率。
11.6 是否符合標準由相關(guān)單位決定
11.7 在報告中注明稀釋液的情況
12 精度和偏差
研究(見13.9)表明在實驗室內(nèi)測試用標準培養(yǎng)基計算(SPC)的精確度如下:
(a)不同試驗人員之間測試結(jié)果允許偏差為18%。
(b)同一試驗人員之間測試結(jié)果允許偏差為8%。
13 參考文獻及注釋
13.1 美國健康部和民政局CDCNIHHS 出版社出版物。第84—8395號。(CDC)
13.2 國家局出版手冊 AGGIH Kemper Woods中心,1330
Kemper Meadow 辛辛那提 博士 45240 電話:5131742—2020
13.3抗菌蛋白胨由Difco實驗室提供,920 圣·亨利博士 底特律 MI48201。
13.4牛肉提取物巴爾的摩生物實驗室提供。250先令的接種環(huán) 科克艾斯維爾 MD 21030 Difco實驗室(地址見上)或美國oxoid有限公司9017 紅牌路 哥倫比亞 MD 21045
13.5連續(xù)和精確的測試需要純的、無污染的、非突變體的測試培養(yǎng)基。
為了防止污染使用優(yōu)良的消毒技術(shù)對培養(yǎng)皿和轉(zhuǎn)移物件進行消毒。為了避免物種突變,要嚴格遵守每月更換。通過定期制作肉塊載物片來檢測培養(yǎng)基并觀測菌落的特征類型情況。
13.6 在和織物的接觸期,如果需要穩(wěn)定態(tài)的培養(yǎng)基,就要事先準備測試菌的稀釋溶液即0.85%的鹽水和適當?shù)木忈屘幚硪骸?br style="margin: 0px; padding: 0px;"/>13.7在稀釋溶劑中加入表面活性劑能提高疏水織物纖維的潤濕性,但這種表面活性劑會導致細菌的數(shù)量減少。通過前面的試驗來確定使用的濃度,記錄活性劑的作用和濃度。
13.8如果用消毒蒸餾水來代替中性溶液,殺生物劑將有可能被帶走。
13.9 Peeler.J.T Leslie J.W. Messer.J.W 復制計算錯誤分析和細菌菌落計算 J.Food Protection vol.45. 1982 238~240頁。
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